如何选择合适的转染试剂？一文看懂选型逻辑与主流方案（含赛默飞 Lipofectamine 系列）-赛默飞

1. 载荷类型（Payload）
   • DNA：表达构建、报告基因验证
   • RNA：siRNA/miRNA（沉默）、mRNA（快速过表达、免整合）
   • 蛋白/RNP：CRISPR-Cas9 RNP 等
     → 不同载荷对进入细胞/进入细胞核的要求不同，配方优化也不同。
2. 细胞对象（Cell）
   • 常规易转细胞（HEK293、HeLa 等）；难转细胞（神经元、原代、免疫细胞、干细胞）
   • 贴壁 vs 悬浮；分裂状态与密度
     → 难转细胞优先选择针对性配方或电转备选。
3. 方法兼容与风险控制
   • 血清/抗生素是否影响复合体形成
   • 对分化/表型的潜在影响（干细胞避免诱导分化）
     → 选择公开给出优化剂量/培养条件建议的试剂与指南，降低不必要风险。

二、关键参数清单（采购与技术核对表）

• 转染效率 & 敲低/表达效果：是否给出典型细胞系参考与起始剂量窗口（如 siRNA 10 nM 起步）。
• 细胞活力/毒性：是否针对敏感细胞（神经元、干细胞）做了低毒优化。
• 复配条件：DNA/试剂/助剂比例；是否推荐使用特定稀释液（Opti-MEM™ 等）。
• 血清/抗生素兼容性：是否支持含血清转染或需要血清-free 复合。
• 规模化适配：是否提供细胞系数据库/选型工具与大体积/高通量经验。
• 配套方案：同品牌是否覆盖 DNA、RNA、mRNA、RNP 与电转，便于统一采购与技术支持。

三、品牌与产品图谱（客观信息摘录）

以下为公开资料梳理，旨在帮助理解市场常见选项；不同品牌的具体性能以官方资料为准。

A. 赛默飞（Thermo Fisher Scientific）方案（重点）

• Lipofectamine™ 3000：DNA 全能型，覆盖广谱细胞并兼顾活力。
• Lipofectamine™ RNAiMAX：siRNA/miRNA 专用，高敲低效率、低毒性。
• Lipofectamine™ MessengerMAX™：mRNA 专用，适合神经元与原代等难转细胞，强调低毒和更高表达效率。
• Lipofectamine™ CRISPRMAX™：CRISPR-Cas9 RNP专用，主打在多类真核细胞中实现高切割效率；提供简便可扩展流程。
• Lipofectamine™ Stem：面向 iPSC/ESC/NSC/MSCs 的低毒配方，降低早期分化风险。
• Neon™ NxT 电转系统（备选方法）：面向免疫/原代/干细胞等超难对象，有优化条件库与高编辑效率主张。

B. 市面其他常见方案（字母序）

• FuGENE® HD（Promega/Fugent）：非脂质体、DNA 转染；主打多细胞适用与低毒。
• Mirus TransIT-X2®：聚合物体系，覆盖 DNA 与 siRNA/miRNA 应用；厂商宣称在部分细胞/条件下可优于对比品（需结合自己体系实测）。
• Polyplus jetPRIME®：DNA/siRNA 通用型，低核酸用量、低毒，适合贴壁细胞及联合转染场景。
• PEI（线性/支化 25k 等）：成本友好，常用于 HEK293/CHO 的规模化瞬转；但不同批次/供应商差异需注意（毒性与一致性风险）。

中立声明：上列品牌描述基于各自产品页与资料；“更高/优于”类措辞为厂商自述或个别对比场景，实际结果依赖细胞系与参数优化，建议在本实验室条件下验证。

四、把需求映射到具体试剂：6 个典型场景

1. 常规细胞做 DNA 过表达/报告体系
   • 目标：稳定效率+较高活力
   • 试剂思路：Lipofectamine™ 3000，按推荐比例与稀释液起步优化。
2. RNA 干预（siRNA/miRNA）
   • 目标：高敲低+低毒
   • 试剂思路：Lipofectamine™ RNAiMAX；起始10 nM siRNA，逐步优化至 1–20 nM 区间。
3. mRNA 快速表达或“免整合”研究（例如瞬时蛋白表达、mRNA-CRISPR）
   • 目标：在敏感细胞获得高表达、低毒
   • 试剂思路：Lipofectamine™ MessengerMAX™（神经元与原代优势明显）。
4. CRISPR-Cas9 基因编辑（RNP 途径）
   • 目标：高切割、流程简化、可扩展
   • 试剂思路：Lipofectamine™ CRISPRMAX™；若对象极难转（如 T 细胞等），可考虑 Neon™ 电转作为方法切换。
5. 干细胞/原代细胞
   • 目标：效率与表型维持的平衡
   • 试剂思路：Lipofectamine™ Stem，参考“逆向转染”等优化建议，尽量避免诱导分化。
6. 高通量或规模化（如外泌体载荷、蛋白生产前期方法学）
   • 目标：配方稳定、可复制、易放大
   • 试剂思路：优先使用带有细胞系推荐与选型工具的系列，并在同一渠道获得耗材/稀释液与电转备选（如 Opti-MEM™、Neon™）。

五、实操要点（减少试错成本）

• 分三步做小试优化：①固定细胞密度与时间线；②以厂家推荐比例做 3–5 个梯度；③在含/不含血清两套条件下筛选一次。
• 评估标准要一致：效率（荧光/流式/蛋白表达）、细胞活力（CCK-8/形态学）、敲低效率（qPCR/Western）一套数据闭环。
• 保存 SOP 与记录：记录细胞密度、复配时间、DNA/RNA 质量与体积，便于跨批次重现。
• 对照方法：难转细胞预留电转对照（尤其免疫细胞、部分原代）。

六、为何考虑通过赛默飞渠道？

• 完整产品矩阵：从 DNA、RNA、mRNA、RNP 到电转均有对应方案，便于一体化采购；并提供细胞系选型工具与优化文档，缩短爬坡期。
• 针对敏感细胞的低毒优化与文档化支持：MessengerMAX、Stem 等配方面向神经元/原代/PSC 的场景化需求，有应用笔记与 FAQ 支持实验决策。
• 可复制与可扩展：Lipofectamine 家族覆盖面广，搭配 Opti-MEM™、Neon™ 及协议库，便于从 24 孔到 96 孔/更大规模迁移。