iPSC多能干细胞研究的基本流程和产品指南-赛默飞

iPSC多能干细胞研究的基本流程和产品指南 

Thermo Fisher Scientific（赛默飞世尔科技）的相关产品覆盖干细胞实验研究中的每一步。从重编程体细胞到 iPSC 培养扩增、、基因编辑、分化与鉴定，为可靠的实验结果提供保证。同时，赛默飞世尔科技也基于iPSC的治疗策略开发过程中的每个阶段（早期研发-临床生产-商业化）提供解决方案。 

诱导多能干细胞（iPSC）目前的主要应用包括但不限于： 

• 基础科学研究（疾病机制、发育生物学、细胞命运决定等） 

• 药物开发与发现（为药物的发现、鉴定和筛选、靶标验证等提供生理相关细胞） 

• 毒理学筛查（用于评估活细胞内化合物或药物的安全性） 

• 干细胞治疗细胞疗法（神经退行性疾病、免疫疾病、糖尿病等适应症） 

• 类器官研究（iPSC来源的组织类器官） 

诱导性多能干细胞研究产品分步指南 

Step 1：重编程 

iPSCs通过特定转录因子的过表达，将体细胞重编程至多能性状态而获得。仙台病毒具有两大主要特点，使其成为重编程的优选系统。首先，仙台病毒可以通过黏附于多种不同类型细胞表面的唾液酸受体来感染细胞，因此可感染多种动物物种的细胞类型。其次，仙台病毒是RNA病毒，从而不会被整合到宿主基因组中。而 Epi5 iPSC episomal载体无需病毒包装即可转染至细胞内，适合于易于重编程的亲本细胞，但需注意DNA载体可能会整合到宿主基因组中。 

产品推荐： 

Essential 8培养基——批次间稳定高，文献引用+1000 

StemFlex培养基——PSC单克隆高效扩增 

CTS CytoTune-iPS 2.1仙台病毒重编程试剂盒——高效重编程，提供法规支持文件 

Epi5™ Episomal iPSC 重编程试剂盒——不依赖病毒的重编程工具 

CytoTune-iPS 2.0仙台病毒重编程试剂盒——高效重编程成纤维细胞和PBMC 

Step 2：培养扩增 

PSC 培养需要一整套兼容的培养基、基质和传代方法，以支持细胞的健康生长和保持细胞的多能性。从最初的含血清培养体系，发展为feeder-free完全培养基体系，再到不含异源/动物源成分的临床级别培养基体系，现在的PSC培养体系可灵活支持各种干细胞研究需求。同时，随着药物开发和治疗的快速发展，研究人员开发出了悬浮培养方法，保证快速、经济、稳定的PSC大量扩增。 

产品推荐： 

StemFlex培养基——PSC单克隆高效扩增 

Essential 8培养基——批次间稳定高，文献引用+1000 

Essential 8 Flex培养基——E8升级款，支持隔天换液 

Gibco™ CTS StemFlex培养基——更稳健高效的干细胞治疗生产工艺 

Gibco™ CTS Essential 8 培养基——不含动物源成分，提供法规支持文件 

CTS StemScale PSC悬浮培养基——不含异源成分，提供法规支持文件 

StemScale PSC悬浮培养基——无需微载体的3D悬浮培养 

Gibco™ KnockOut™血清替代物——批次间稳定性高，30年的经典选择 

KnockOut™ D-MEM培养基——批次间稳定性高，PSC高效扩增 

截短型人重组玻连蛋白 (rhVTN-N) ——Essential 8经典搭配基质 

Gibco™ KnockOut™ DMEM/F-12培养基——批次间稳定性高，PSC高效扩增 

Gletrex基质胶——批次间更一致的蛋白质浓度 

StemPro™ Accutase™ 细胞解离试剂——更温和的干细胞解离试剂 

重组人层粘连蛋白rhLaminin-521——无需添加ROCK抑制剂的基质 

分散酶 II（中性蛋白酶）——相对温和，适用于原代细胞的分离 

TrypLE™ Select 酶 (1X)，无酚红——不含动物源成分，单细胞解离 

Countess 3系列自动细胞计数仪——准确、精密、省时 

Step 3：基因编辑 

PSC 的自我更新和分化能力使其非常适合构建疾病模型和细胞模型，用于药物开发和细胞治疗应用。通过化学转染或者电转Cas9蛋白复合体的方法，对PSC进行基因编辑进一步提升了其在科研和临床领域的实用性，可实现复杂的遗传疾病模型构建。使用Invitrogen TrueDesign 基因组编辑工具，免费设计5个物种中的6种基因编辑设计。 

产品推荐： 

TrueCut™ Cas9 v2——高编辑效率，ISO 13485质量标准 

Invitrogen™ TrueCut™ HiFi Cas9——低脱靶效应，高编辑效率 

Lipofectamine™ Stem 转染试剂——多种干细胞中均实现高转染效率 

Gibco™ TrueCut™ Cas9 蛋白——cGMP级别生产，提供法规支持文件 

Invitrogen™ TrueDesign 基因组编辑工具——5个物种、6种基因编辑设计 

CTS™ HiFi Cas9 Protein——cGMP级别生产，提供法规支持文件 

TrueGuide 合成 gRNA——经化学修饰，稳定性高 

Neon NxT™ 电转染系统——可靠的转染性能 

Step 4：诱导分化 

当培养在特定的体系中（B-27/N2添加剂、生长因子、小分子），PSCs 可分化为特定的三胚层细胞谱系，包括神经元、心肌细胞、胰岛细胞等体内其他任意细胞类型。 

产品推荐： 

经典款B-27添加剂——批次间稳定高，文献引用+30,000 

Gibco™ B-27 Plus添加剂——更高的神经元存活率 

不含维生素A的B-27添加剂——批次间稳定高，文献引用+30,000 

Gibco™ Neurobasal™ 培养基——维持高纯度的神经元培养 

不含胰岛素的B-27添加剂——批次间稳定高，文献引用+30,000 

Gibco™ CTS B-27 XenoFree 添加剂——不含异源成分，提供法规支持文件 

Gibco™ N-2 添加剂——批次间稳定高，文献引用+30,000 

PeproTech细胞因子——重组蛋白和生长因子种类+1,000 

Gibco™ CTS B-27 XenoFree 添加剂——不含异源成分，提供法规支持文件 

PSC多巴胺能神经元分化试剂盒——高效的神经元分化 

PSC心肌细胞分化试剂盒——心肌细胞分化仅需8天，维持培养超15天 

PSC定形内胚层诱导试剂盒——2天内获得定形内胚层细胞 

Step 5：分析鉴定 

鉴定在干细胞研究中是必要步骤，主要测试干细胞功能多能性，及是否存在可能影响细胞行为和安全的异常，除此之外，可能还需要鉴定来确定干细胞分化后形成的细胞类型。 

产品推荐： 

SuperScript IV VILO预混液——10分钟快速完成反转录 

High-Capacity cDNA反转录试剂盒——动态范围比同类试剂盒大10倍 

Invitrogen干细胞标记物抗体——严格两步法验证的高级验证抗体 

Cells-to-CT™ 试剂盒——10分钟内可完成96个RT-qPCR样本制备 

Molecular Probes荧光标记和检测试剂——极高的文献引用数量 

EVOS 智能活细胞成像分析系统——双相机双光路共聚焦显微镜系统 

iBright成像系统——910万像素，4色荧光同时成像 

Invitrogen™ Attune™ CytPix™ 成像型流式细胞仪——声波聚焦技术，6000张图片/秒 

无论您是利用多能干细胞 （PSC） 进行基础研究还是应用研究临床转化，PSC 培养基的卓越性能和质量对于取得成功都至关重要。正因如此，赛默飞开发了一套创新、全面的 Gibco 干细胞培养基，支持多样化的工作流程，使科学家能够突破干细胞研究的界限。 

我们产品组合的广度包括： 

• 适用于各种应用的解决方案—Gibco 培养基支持小鼠和人 PSC 培养。 

• 满足最具挑战性的应用需求—除常规干细胞培养之外，Gibco 培养基可用于基因编辑、疾病建模和细胞治疗。 

• 高质量的 GMP 标准生产 —Gibco PSC 培养基在经过 ISO 13485 认证的设施中生产，并符合医疗器械生产质量管理规范 （GMP），以确保产品性能、一致性和可靠性。 

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