β-Actin内参蛋白原理和应用 -赛默飞

β-Actin内参蛋白原理和应用 

β 肌动蛋白抗体提供了一种特异性的工具，用于研究 β 肌动蛋白的胞内分布、细胞骨架的静态和动态特性。由于 β 肌动蛋白在所有真核细胞中普遍都有表达，因此其经常被用作上样对照。β 肌动蛋白是哺乳动物中已鉴别出的六种肌动蛋白亚型之一。肌动蛋白是细胞骨架的主要组分， β 肌动蛋白主要在非肌细胞中表达并控制细胞的结构和运动。优质 Invitrogen β 肌动蛋白抗体可满足多种研究需求。为使您更方便，我们还提供荧光和酶偶联版本。 

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β-Actin内参蛋白的应用 

使用 70% 融合对数期 NIH-3T3 细胞进行 β 肌动蛋白的免疫荧光分析。将细胞用 4％ 多聚甲醛固定 10 分钟，用 0.1％ Triton X-100 透化 10 分钟，并在室温下用 1% BSA 封闭 1 小时。使用 0.1% BSA 中 2µg/mL 的β 肌动蛋白兔多克隆抗体（货号 PA1-46296）标记细胞并在室温下孵育 3 小时，然后用山羊抗兔 IgG (H+L) Superclonal 二抗、Alexa Fluor® 488 偶联物（货号 A27034）以 1:2000 稀释比在室温下标记 45 分钟（图 A：绿色）。细胞核（图 b：蓝色）用 SlowFade Gold 抗淬灭封片剂 ，带DAPI（货号 S36938）染色。F 肌动蛋白（图 c：红色）采用罗丹明鬼笔环肽（货号 R415，1:300）进行染色。图 d 代表合并图像，表示细胞质的定位情况。图 e 表示无一抗对照。这些图像是在放大60倍的情况下采集的。 

与同型对照（蓝色）相比，A431 细胞（绿色）中 β 肌动蛋白的流式细胞术分析。收获细胞并用 PBS 洗涤。在室温下，用 2% BSA-PBS 溶液封闭细胞 30 分钟，并与 β 肌动蛋白上样对照单克隆抗体（BA3R），生物素（货号号 MA5-15739-BTIN）进行孵育。然后将细胞在室温下用与 DyLight 488 染料偶联的二抗避光孵育 40 分钟，并重悬于 PBS 中以进行 FACS 分析。 

细胞：A431 

浓度：2 ug/ 检测（100 uL） 

理论位置：细胞质 

通过将各种细胞裂解物上样到 4-20% Tris-HCl 聚丙烯酰胺凝胶上，对 β 肌动蛋白进行蛋白质印迹分析。将蛋白转印到低荧光 PVDF 膜上，并用与 Alexa Fluor 488 染料（货号 MA1-140-A488）偶联的 β 肌动蛋白单克隆抗体孵育。 

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